将已知抗原（精子）与第一抗体（待检血清）结合后，再与经异硫氰酸荧光素（FITC）标记的第二抗体结合后，在荧光显微镜下，可见绿色荧光，从而判断患者血清中是否存在抗精子抗体。

　　【试剂】

　　（1）0.01mol/L pH 7.4 磷酸缓冲液（PBS）。

　　（2）甲醇（分析纯）。

　　（3）羊抗人 IgG-FITC。

　　【方法】

　　（1）取正常男性精液，自然液化。

　　（2）PBS离心洗涤 3次，去除精浆，调精子浓度为 5×104/mL。

　　（3）精子悬液涂片，室温自然干燥。

　　（4）甲醇固定 10min。

　　（5）滴加待检血清、阳性血清、阴性血清（处女 AB 型血清），37℃ 湿盒30min。

　　（6）PBS洗 3次，每次浸洗 3min。

　　（7）滴加羊抗人 IgG-FITC，37℃ 湿盒 30min。

　　（8）PBS洗 3次后，荧光镜下观察结果。

　　【结果】

　　荧光镜下观察，精子头部、中段出现荧光为抗精子抗体阳性